“Aislamiento e identificación de compuestos naturales activos contra Aeromonas hydrophila a partir de la microbiota de Hermetia illucens”

Abstract

Hermetia illucens es una mosca tropical cuyas larvas albergan una microbiota digestiva con propiedades antimicrobianas contra bacterias patógenas para humanos y animales de granja presentes en los desechos orgánicos. Ante estos hallazgos, nos planteamos como objetivo del estudio aislar e identificar preliminarmente nuevos compuestos activos contra la bacteria patógena Aeromonas hydrophila a partir de hongos previamente aislados del tracto digestivo de H. illucens. Se seleccionaron nueve especies de hongos (Pichia kudriavzevii, Candida glabrata, Stephanoascus ciferrii, Trichosporonales no clasificados, Candida pseudorugosa, Aspergillus sp., Scopulariopsis brevicaulis, Chrysosporium multifidum y Penicillium janthinellum) para evaluar su capacidad inhibitoria contra A. hydrophila mediante el método de cocultivo. A partir del hongo S. brevicaulis que mostró un halo de inhibición de 6.4mm, se preparó un extracto Diclorometano (DCM) el cual presentó una IC50 de 0.3mg/mL y una MIC de 0.5mg/mL utilizando la técnica de microdilución en caldo. El fraccionamiento biodirigido del extracto DCM permitió concentrar la actividad selectiva sobre A. hydrophila en las subfracciones 4.5, 4.6 y 4.7 con valores de MIC de 125, 250 y 62.5μg/ml respectivamente. El análisis preliminar mediante UPLC-HRMS de las tres subfracciones activas permitió detectar catorce compuestos por comparación con bases de datos, incluyendo dipéptidos, lipopéptidos y derivados del ácido cólico, así como, lipopéptidos no descritos previamente.

Hermetia illucens is a tropical fly whose larvae host a digestive microbiota with antimicrobial properties against pathogenic bacteria for humans and farm animals present in organic waste. In view of these findings, the aim of the study was to isolate and preliminarily identify new compounds active against the pathogenic bacterium Aeromonas hydrophila from fungi previously isolated from the digestive tract of H. illucens. Nine fungal species (Pichia kudriavzevii, Candida glabrata, Stephanoascus ciferrii, unclassified Trichosporonales, Candida pseudorugosa, Aspergillus sp., Scopulariopsis brevicaulis, Chrysosporium multifidum and Penicillium janthinellum) were selected to evaluate their inhibitory capacity against A. hydrophila by the coculture method. From the fungus S. brevicaulis with showed an inhibition halo of 6.4mm, a dichloromethane (DCM) extract was prepared which presented an IC50 of 0.3mg/mL and a MIC of 0.5mg/mL using the broth microdilution technique. Bioguided fractionation of the DCM extract allowed concentrating the selective activity against A. hydrophila in subfractions 4.5, 4.6 and 4.7 with MIC values of 125, 250 and 62.5μg/mL respectively. Preliminary analysis by UPLC-HRMS of the three active subfractions allowed the detection of fourteen compounds by databases comparison, including dipeptides, lipopeptides and cholic acid derivatives, as well as previously undescribed lipopeptides.