Evaluación in vitro del potencial cicatrizante de heridas de un gel de fibrina rico en plaquetas y células madre mesenquimales de cordón umbilical

Abstract

Las úlceras crónicas cutáneas representan un problema importante de salud pública debido a las consecuencias que genera en el paciente. El presente estudio está fundamentado en la necesidad de diseñar, preparar y evaluar en ensayos in vitro el potencial regenerativo de un producto biológico obtenido de la combinación de plaquetas y células madres mesenquimales de cordón umbilical (MSC-CU) sobre una base de gel de fibrina, con potencial aplicación en úlceras cutáneas de índole crónica. Para ello se protocolizó la obtención de MSC-CU, las cuales fueron cultivadas y caracterizadas por citometría de flujo y se demostró su capacidad de diferenciación hacia el linaje osteogénico, condrogénico y adipogénico. También se obtuvo plaquetas por aféresis sanguínea, las cuales fueron requeridas para la formación del gel de fibrina rico en plaquetas (GFRP), el gel de fibrina pobre en plaquetas (GFPP), GFRP combinado con MSC-CU y GFPP combinado con MSC-CU. Los productos desarrollados fueron incubados hasta por 96 horas, liberando un líquido seroso, en el cual se midieron la concentración de los factores de crecimiento: PDGF-BB, EGF y VEGF. También se midieron los factores inmunomoduladores TGF-β1 y prostaglandina E2. Adicionalmente el líquido seroso liberado (medio condicionado) fue estudiado como suplemento en los medios de cultivo para estimular la proliferación y migración celular de fibroblastos dérmicos. La cinética de liberación de las biomoléculas evidenció una liberación similar entre el GFRP y GFRP-MSC a excepción de la PGE2 que tuvo una mayor concentración en este último producto. Los ensayos de migración y proliferación mostraron que el GFRP y el GFRP-MSC tienen un efecto similar significativo en comparación con el GFPP-MSC. En conclusión, el gel de fibrina con plaquetas y MSC-CU muestra un efecto regenerativo in vitro similar que el gel de fibrina solo con plaquetas.