Aislamiento e Identificación de Compuestos Naturales a partir de la microbiota de Hermetia illucens activos contra Aeromonas hydrophila

Abstract

Hermetia illucens es una mosca tropical cuya larva contiene una microbiota digestiva capaz de controlar o eliminar bacterias patógenas para el hombre y animales de granja presentes en desechos orgánicos. El objetivo del estudio es aislar e identificar nuevos compuestos a partir de los hongos presentes en el tracto digestivo de H. illucens que sean activos contra la bacteria Aeromonas hydrophila, responsable de grandes pérdidas económicas en la acuicultura. Metodología: Los hongos Aspergillus sp, Scopulariopsis brevicaulis, Chrysosporium multifidum y Penicillium janthinellum previamente aislados de la mosca H. illucens fueron enfrentados contra A. hydrophila empleando el método de cocultivo. Posteriormente, cultivos en caldo de los hongos más activos permitieron obtener extractos en solventes de polaridad creciente. Los extractos fueron evaluados por bioautografía y se determinó la IC50 y la MIC mediante la técnica de microdilución en caldo. El extracto más activo fue fraccionado mediante MPLC y se analizó la actividad microbiológica y el perfil de compuestos presentes en dichas fracciones mediante cromatografía líquida de ultra resolución acoplada a espectrometría de masas de alta resolución (UPLC-HRMS). Resultados: Los hongos Aspergillus sp., S. brevicaulis, C. multifidum y P. janthinellum generaron un diámetro de inhibición de crecimiento sobre A. hydrophila de 15, 6.4, 8 y 13 mm respectivamente. El extracto diclorometano del hongo S. brevicaulis mostró una IC50 de 0.3 mg/ml y una MIC de 0.5 mg/ml sobre la bacteria A. hydrophila. El fraccionamiento del extracto mediante MPLC generó 11 fracciones. Las fracciones fuero analizadas mediante bioautografía sobre agar encontrándose que dos de ellas mostraban la mejor actividad. En el análisis preliminar por UPLC-HRMS algunos compuestos fueron anotados por comparación con bases de datos, entre los que destacan lipopéptidos y derivados del ácido hiocolico. Ensayos de purificación bioguiada se encuentran en curso para determinar los compuestos responsables de la actividad sobre A. hydrophila.