Caracterización fenotípica y genotípica de cepas de Klebsiella pneumoniae productoras de carbapenemasas aisladas de muestras clínicas provenientes de centros de salud durante el 2018 al 2022

Abstract

Introducción: La resistencia bacteriana se ha convertido en un problema de salud pública, debido a su alarmante incremento y aparición cada vez más frecuente de bacterias multirresistente y panresistentes representando serios retos para el tratamiento de estas infecciones. Los carbapenems son antibióticos betalactámicos dotados de mayor espectro y actividad, siendo los más resistentes frente a betalactamasas. Son considerados imprescindibles al momento de tratar infecciones nosocomiales graves e infecciones producidas por bacterias multirresistentes, por lo que la aparición de betalactamasas que hidrolizan carbapenems denominadas carbapenemasas se ha convertido en un gran desafío. La detección y dispersión de enterobacterias resistentes a carbapenémicos es un problema de salud pública a nivel mundial, y nuestro país no es ajeno a esta realidad. Objetivo: Caracterizar el fenotipo y genotipo de cepas de Klebsiella pneumoniae productoras de carbapenemasas aisladas de muestras clínicas provenientes de Centros de Salud en Perú. Métodos: Se desarrollará un estudio transversal y descriptivo de cepas de Klebsiella pneumoniae productoras de carbapenemasas provenientes de muestras biológicas recolectados de centros de salud tanto públicos como privados. Para la caracterización fenotípica se determinará el perfil de resistencia bacteriano con los datos obtenidos del antibiograma por disco difusión y para detectar carbapenemasas tipo KPC y Metalobetalactamasas se realizará la prueba de sinergia con ácido borónico (APB) y ácido etilendiaminotetraacético (EDTA). Para la caracterización genotípica se realizará la identificación de los tipos de genes de carbapenemasas mediante PCR múltiplex para los genes blaNDM, blaKPC, blaOXA-48, blaIMP, blaVIM. El estudio de clonalidad de las cepas se realizará mediante la técnica de MLST, finalmente se desarrollarán ensayos de conjugación para determinar la transferencia de plásmidos portadores de genes de resistencia.

Introduction: Bacterial resistance has become a public health problem, due to its alarming increase and the increasingly frequent appearance of multi-resistant and pan-resistant bacteria, representing serious challenges for the treatment of these infections. Carbapenems are beta-lactam antibiotics with a broader spectrum and activity, being the most resistant to beta-lactamases. They are considered essential when treating serious nosocomial infections and infections caused by multiresistant bacteria, so the appearance of beta-lactamases that hydrolyze carbapenems called carbapenemases has become a great challenge. The detection and spread of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae is a public health problem worldwide, and our country is no stranger to this reality. Objective: To characterize the phenotype and genotype of carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae strains isolated from clinical samples from Health Centers in Peru. Methods: A cross-sectional and descriptive study of carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae strains from biological samples collected from both public and private health centers will be developed. For the phenotypic characterization, the bacterial resistance profile will be determined with the data obtained from the antibiogram by disc diffusion and to detect KPC-type carbapenemases and Metallobetalactamases, the synergy test will be carried out with boronic acid (APB) and ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA). For the genotypic characterization, the identification of the types of carbapenemase genes will be carried out by multiplex PCR for the blaNDM, blaKPC, blaOXA-48, blaIMP, blaVIM genes. The clonality study of the strains will be carried out using the MLST technique, and finally conjugation tests will be developed to determine the transfer of plasmids carrying resistance genes.