Determinación de la actividad antifúngica de nanopartículas poliméricas de quitosano cargadas con ácido S-Nitrosomercaptosuccínico sobre Candida albicans y Candida glabrata

Abstract

Las especies de Candida sp. son los mayores patógenos fúngicos que afectan al ser humano. Últimamente, han descrito cambios en sus patrones de susceptibilidad a los fármacos antifúngicos de primera línea. En vista de esto, se necesitan alternativas de tratamiento que actúen mediante mecanismos de acción distintos. El óxido nítrico (NO) es una molécula importante para la inmunidad innata porque ejerce su efecto antimicrobiano principalmente por el daño oxidativo que produce sobre los microorganismos. Dado que ésta es una molécula lábil, su administración es complicada por lo que investigaciones recientes han propuesto el uso de drogas donadoras de NO. Asimismo, con el fin de incrementar su vida media, se han incluido estos compuestos en matrices poliméricas para la liberación controlada del NO. En el presente trabajo se determinó la actividad antifúngica de nanopartículas poliméricas de quitosano cargadas con el donador de NO, el ácido s-nitrosomercaptosuccínico (MSA-NO) sobre las cepas clínicas Candida albicans y Candida glabrata. La síntesis de nanopartículas poliméricas de quitosano cargadas con ácido mercaptosuccínico (MSA Np) se llevó a cabo mediante el método de gelación ionotrópica. Se produjeron tres lotes a los que se les analizaron los parámetros físicos (diámetro efectivo promedio de partícula e índice de polidispersidad) y eficiencia de encapsulación del ácido mercaptosuccínico (MSA). Tras agregarse una cantidad equimolar de nitrito de sodio (NaNO2), se obtuvieron nanopartículas poliméricas de quitosano cargadas con ácido s-nitrosomercaptosuccínico (MSA-NO Np). Luego, se determinó la actividad antifúngica contra Candida sp. en valores de concentración mínima inhibitoria (CMI) por el método de Microdilución en Caldo M27-A3 del CLSI (Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio) y se estimó el perfil de liberación de NO a las MSA-NO Np. Se realizaron ensayos piloto para establecer una formulación de MSA Np y un procedimiento de síntesis óptimos para ser reproducidos a mayor escala. Una vez alcanzado esto, se sintetizaron tres lotes de MSA Np de un diámetro efectivo (DE) promedio de 241.69 ± 18.95 nm, un índice de polidispersidad (IPD) promedio de 0.274 ± 0.015 y una eficiencia de encapsulación (EE%) del MSA promedio de 97.52 ± 0.07 %. Estos valores estuvieron de acuerdo a las especificaciones de calidad establecidas. Respecto a la actividad antifúngica, los valores CMI de las cepas clínicas Candida glabrata y Candida albicans fueron 0.28 mg/mL y 2.25 mg/mL, respectivamente. Se halló una mayor susceptibilidad de la cepa referencial ATCC (Colección Americana de Tipos de Cultivo) Candida krusei al MSA-NO mientras la cepa clínica Candida albicans fue entre todas la menos susceptible al daño oxidativo causado por esta molécula. Si bien no hay pruebas contundentes que indiquen que el quitosano de las MSA-NO Np ejerció alguna contribución para disminuir el CMI del MSA-NO, este resulta útil como matriz polimérica para promover la liberación controlada del NO. En función a lo observado se concluye que las MSA-NO Np presentan actividad antifúngica sobre el género Candida, causando inhibición en un grado diferente de acuerdo a la especie. Esta formulación representa una alternativa promisoria para el tratamiento de candidiasis.