Modelo de trombosis en la cola de ratón inducido por k-carragenano para el estudio del agente fibrinolítico FhT in vivo

Abstract

Las enfermedades cardiovasculares son la principal causa de muerte en el mundo y son causadas por coágulos en el sistema circulatorio. Los fármacos trombolíticos activan el plasminógeno hacia plasmina que degrada las redes de fibrina, un componente que estabiliza los coágulos. Estos fármacos también pueden activar el plasminógeno circulante produciendo plasmina que puede degradar otras proteínas ocasionando hemorragias. Por este motivo, existe un interés en la búsqueda de fármacos que degraden la fibrina directamente. Las enzimas FhT y su forma recombinante (rFhT) degradan la fibrina in vitro. En esta tesis, se establecieron las condiciones para inducir trombosis en la cola con kappa-carragenano y se utilizó este modelo para evaluar la actividad trombolítica de FhT y rFhT. Las condiciones para inducir trombosis como la aclimatación de los ratones por 3 semanas a 24 °C, la disolución del k-carragenano a 85 °C y la administración de la solución de k-carragenano a 50 °C a una dosis de 20 mg/kg resultaron en un porcentaje de trombosis en la cola de 90 ± 4 %. Los ratones inducidos a trombosis con 20 mg/kg de k-carragenano y tratados con 20 mg/kg de rFhT tuvieron un porcentaje de trombosis en la cola significativamente menor (58.2 ± 13.1 %) en comparación con los ratones inducidos a trombosis y tratados con solución salina (92.8 ± 11.2 %). No se encontró diferencias significativas en el porcentaje de trombosis en los ratones inducidos a trombosis y tratados con 20 mg/kg de FhT comparado con los ratones inducidos a trombosis y tratados con solución salina.

Cardiovascular diseases are the leading cause of death in the world and are caused by clots in the circulatory system. Thrombolytic drugs activate plasminogen toward plasmin that degrades fibrin networks, a component that stabilizes clots. These drugs can also activate circulating plasminogen, producing plasmin, which can degrade other proteins, causing bleeding. For this reason, there is interest in the search for drugs that directly degrade fibrin. FhT enzymes and their recombinant form (rFhT) degrade fibrin in vitro. In this thesis, conditions were established to induce tail thrombosis with kappa-carrageenan and this model was used to evaluate the thrombolytic activity of FhT and rFhT. The conditions to induce thrombosis such as acclimatization of the mice for 3 weeks at 24 °C, dissolution of k-carrageenan at 85 °C and administration of the k-carrageenan solution at 50 °C at a dose of 20 mg/ kg resulted in a tail thrombosis percentage of 90 ± 4 %. Mice induced to thrombosis with k-carrageenan 20 mg/kg and treated with 20 mg/kg rFhT had a significantly lower percentage of tail thrombosis (58.2 ± 13.1 %) compared to mice induced to thrombosis and treated with saline solution (92.8 ± 11.2 %). No significant differences were found in the percentage of thrombosis in the mice induced to thrombosis and treated with FhT 20 mg/kg compared to mice induced to thrombosis and treated with saline solution.