Publicación:

Aislamiento y caracterización de compuestos activos anti-helicobacter pylori a partir de la planta Otholobium Mexicanum (L. F.) J. W. Grimes

Resumen

In order to find natural products with anti-Helicobacter pylori activity, an in vitro screening of 187 crude ethanol extracts from plants used in traditional medicine for stomach problems was carried out during the present study; comparing the results with the clinical isolate strain NCO159A. After the pharmacological screening, it was found that Otholobium mexicanum was an active plant with an IC50 = 285 mg / mL and a MIC = 500 mg / mL. During the evaluation of the crude plant with solvents of increasing polarity it was found that the petroleum ether extract was the most active with an IC50 = 49.5 mg / mL and a MIC = 125 mg/mL. Column chromatography (CC) on normal phase allowed the isolation of a mixture of 4 saturated hydrocarbons which were identified by GC-MS: nonacosane, octacosane, heptacosane and hexatriacontane which presented an IC50= 82.5 mg / mL and MIC = 250 mg / mL. Column chromatography and medium pressure liquid chromatography (MPLC) using the bioguide isolation allowed too the isolation of bakuchiol witch presented an IC50 = 59.4 mg / mL and MIC = 250 mg / mL. The mixture of hydrocarbons and bakuchiol were also evaluated on clinical strain TIF03 and the reference strain CIP 103995 being also active on them. The mixture of unsaturated compounds were characterized by 1H and 13C NMR spectroscopy of one dimension and identified by GC-MS, while the bakuchiol was characterized by 1H and 13C NMR spectroscopy, experiments in 2D (COSY, HSQC and HMBC) and ESI and APCI MS spectrometry, being the most active compound bakuchiol. This study is a contribution to the traditional use of Otholobium mexicanum used in Peru in gastrointestinal disorders. (AU),En la búsqueda de productos naturales con actividad anti-Helicobacter pylori se realizó un screening in vitro de 187 extractos etanólicos crudos de plantas de la medicina tradicional para problemas del estómago frente a la cepa NCO159A de aislado clínico. Luego del screening farmacológico se encontró a Otholobium mexicanum como planta activa con una CI50 = 285 mg/mL y una CMI = 500 mg/mL. Al evaluar los extractos crudos de la planta, obtenidos con solventes de polaridad creciente, se encontró al extracto de éter de petróleo como el más activo con una CI50 = 49.5 mg/mL y una CMI = 125 mg/mL. Por cromatografía en columna (CC) en fase normal se aisló una mezcla de 4 hidrocarburos saturados que fueron identificados por GC-MS como: nonacosano, octacosano, heptacosano y hexatriacontano con CI50 = 82.5 mg/mL y CMI = 250 mg/mL, y por CC y cromatografía líquida de media presión (MPLC) mediante aislamiento biodirigido se aisló el bakuchiol con una CI50 = 59.4 mg/mL y CMI = 250 mg/mL. La mezcla de hidrocarburos y el bakuchiol también fueron evaluados sobre la cepa clínica TIF03 y la cepa referencial CIP 103995 siendo también activos sobre las mismas. La mezcla de compuestos saturados fueron caracterizados por espectroscopia de RMN de 1H y 13C de una dimensión e identificados por GC-MS, mientras que el bakuchiol fue caracterizado por espectroscopía de RMN de 1H y 13C (Jmod) y experimentos en 2 dimensiones (COSY, HSQC y HMBC) y espectrometría MS ESI y APCI, siendo el bakuchiol el compuesto caracterizado más activo. Este estudio es un aporte del uso tradicional de Otholobium mexicanum utilizada en el Perú en trastornos gastrointestinales. (AU)