Evaluación de proteínas recombinantes del estadío asexual de Plasmodium spp. como nuevos marcadores de seroprevalencia de malaria en la Amazonía peruana

Abstract

Malaria seroprevalence evaluation is a transcendental step to carry out real monitoring of disease transmission. For this reason, this study have focused on the production (Baculovirus expression and insect cells) and evaluation of the recombinant rPvMSP8 and rPfRH2B proteins of Plasmodium vivax and P. falciparum respectively, as new malaria sero-marker in the Peruvian Amazon. These proteins were evaluated together with rPvMSP10 and rPfMSP10 proteins (previously evaluated by our group) in conjunction with reference seromarchers (rPvMSP1, rPvAMA1, rPfMSP1 and rPfGLURP). For this, 421 serum samples from a cross sectional study population of two Loreto communities, Cahuide (n = 257) and Lupuna (n = 164), were used to assess specific IgG levels against the 8 recombinant proteins using a Luminex® multiplex assay. A multivariate regression analysis indicated that the IgG titers for the 4 novels proteins were associated with the patients' age, showing a possible cumulative response, generating humoral memory, both in exposed and unexposed patients. In addition, IgG titers for PvMSP10 and PvMSP8 were significantly associated with the history of P. vivax passed infections only in the low transmission community (Cahuide). These results suggest that in order to maintain and detect specific circulating levels of IgG against these proteins, recurrent exposure to Plasmodium spp. is necessary, and thus would be suitable as possible serological markers useful for the identification of remaining transmission hotspots. However, additional studies are necessary to confirm these proteins as seromarkers.

La evaluación de marcadores de seroprevalencia de malaria es un paso trascendental para llevar a cabo un monitoreo real de la transmisión de la enfermedad. Por esta razón, este estudio se centró en la producción (expresión Baculovirus y células de insecto) y evaluación de las proteínas recombinantes rPvMSP8 y rPfRH2B de Plasmodium vivax y P. falciparum respectivamente, como nuevos seromarcadores de malaria en la Amazonia peruana. Así mismo, se evaluó en conjunto con las proteínas rPvMSP10 y rPfMSP10 (evaluados por nuestro grupo) en conjunto con seromarcadores de referencia (rPvMSP1, rPvAMA1, rPfMSP1 y rPfGLURP). Para esto, 421 muestras de suero provenientes de un barrido poblacional de las comunidades de Cahuide (n=257) y Lupuna (n=164), en el departamento de Loreto, fueron utilizados para evaluar los niveles de IgG específicos contra las 8 proteínas recombinantes mediante la plataforma de ensayo Luminex® multiplex. Un análisis de regresión multivariada indicó que los títulos de IgG para las 4 proteínas estuvieron asociados a la edad de los pacientes, mostrando una posible respuesta acumulativa, generando memoria humoral, tanto en pacientes expuestos y no expuestos. Además, los títulos de IgG para PvMSP10 y PvMSP8 se asociaron significativamente con la historia de infecciones pasadas por P. vivax solo en la comunidad con baja trasmisión (Cahuide). Estos resultados demuestran que para mantener y detectar niveles circulantes de IgG específicos contra estas proteínas se necesitaría exposición recurrente a Plasmodium spp., y así serian de utilidad como posibles marcadores serológicos útiles para la identificación de “hotspots” de transmisión remanentes. Sin embargo, son necesarios estudios adicionales para confirmar a estas proteínas como seromarcardores.