Medición del factor de crecimiento endotelial vascular del plasma rico en plaquetas según diferentes concentraciones de gluconato de calcio variando el tiempo y fuerza gravitacional de centrifugación

Abstract

Introducción: Plasma rico en plaquetas (PRP) es un producto terapéutico, con una amplia aplicación en medicina regenerativa y cosmética, debido a que es importante reservorio de factores de crecimiento como el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), responsable de los procesos en angiogénesis y regeneración de tejidos dañados. Sin embargo, la obtención de PRP no presenta una estandarización actual, ni valoración de los diferentes factores de crecimiento, afectando la efectividad, tiempo y dinero en el tratamiento de los pacientes. Objetivo general: Comparar las cantidades liberadas de VEGF en PRP activado con diferentes diluciones Glu.Ca, en PRP obtenido por los métodos de Centrifugación simple (CS) y Centrifugación doble (CD). Materiales y métodos: Fueron enrolados 20 voluntarios sanos entre 18 a 40 años de edad. Las muestras de sangre fueron sometidos a dos métodos de centrifugación: CS y CD, el PRP obtenido fue activado con diferentes diluciones y concentraciones de Glu.Ca 10% 1/5 D1 (0.02 g/mL), 1/10 D2 (0.01 g/mL) y 1/20 D3 (0.005 g/mL), el VEGF liberado fue cuantificado mediante ELISA directo a 450nm. Resultados: Las plaquetas concentradas mediante el método de CS y CD, mostraron una mediana y un rango intercuartil de: 408.5 x 103 plaquetas/uL (382.75-473.0) y 532.5 x 103 plaquetas/uL (410.5-613.0) respectivamente, no se encontró diferencia significa entre ambos métodos. Con respecto a la cuantificación de VEGF, se encontró diferencia significativa entre el método de CS vs CD para la liberación de VEGF con un p<0.0001. Con respecto a las diluciones no se encontró diferencias significativas entre las diluciones D1, D2 y D3 en los métodos de CS y CD con un p>0.05. Conclusiones: El método de CS, mostro mayor liberación de VEGF con respecto al método de CD. Las diluciones de Glu.Ca 1/5 D1 (0.02 g/mL) y 1/10 D2 (0.01 g/mL), fueron las que produjeron mayor liberación de VEGF en el método de CS.

Introduction: Platelet-rich plasma (PRP) is a therapeutic product, with a wide application in regenerative and cosmetic medicine, because it is an important reservoir of growth factors such as vascular endothelial growth factor (VEGF), responsible for the processes in angiogenesis and regeneration of damaged tissues. However, obtaining PRP does not present a current standardization, nor assessment of the different growth factors, affecting the effectiveness, time and money in the treatment of patients. General objective: To compare the amounts of VEGF released in activated PRP with different Glu.Ca dilutions, in PRP obtained by the Simple Centrifugation (CS) and Double Centrifugation (CD) methods. Materials and methods: 20 healthy volunteers between 18 and 40 years of age were enrolled. The blood samples were subjected to two centrifugation methods: CS and CD, the PRP obtained was activated with different dilutions and concentrations of Glu.Ca 10% 1/5 D1 (0.02 g/mL), 1/10 D2 (0.01 g /mL) and 1/20 D3 (0.005 g/mL), the released VEGF was quantified by direct ELISA at 450nm. Results: Concentrated platelets using the CS and CD methods showed a median and interquartile range of: 408.5 x 103 platelets/uL (382.75-473.0) and 532.5 x 103 platelets/uL (410.5-613.0), respectively. difference means between both methods. Regarding the VEGF quantification, a significant difference was found between the CS vs CD method for VEGF release with p<0.0001. Regarding the dilutions, no significant differences were found between the D1, D2 and D3 dilutions in the CS and CD methods with a p>0.05. Conclusions: The CS method showed a greater release of VEGF compared to the CD method. The Glu.Ca dilutions 1/5 D1 (0.02 g/mL) and 1/10 D2 (0.01 g/mL), were the ones that produced the highest release of VEGF in the CS method.