Evaluación del perfil inmunológico de personas expuestas a Leishmania braziliensis por visitas a áreas endémicas

Abstract

Personas que visitan áreas endémicas a Leishmaniasis podrían estar expuestas al parásito pero no desarrollarían necesariamente ninguna manifestación clínica. El objetivo de este estudio fue determinar la contribución de factores inmunes al desenlace clínico de la enfermedad. Debido a que la respuesta inmune juega un rol central en este proceso, se investigó la respuesta inmune celular y humoral en individuos asintomáticos. Suero y sangre fue colectada a partir de individuos con leishmaniasis cutánea (LC; n = 7), leishmaniasis mucosa (LM; n = 12) y aquellos sin signos ni síntomas de la enfermedad (n = 28). Los individuos control fueron sujetos sanos (HS; n = 8) que manifestaron no haber visitado áreas endémicas. CMSP fueron estimulados con antígeno soluble total de Leishmania (ASTL) a partir de L. braziliensis y la linfoproliferación fue medida por incorporación de timidina [3H] en un contador de emisiones beta. Los valores de índice de estimulación (IE) mayores a 2.47 fueron considerados positivos. Las citoquinas fueron medidas en sobrenadante de cultivo celular mediante el kit de BD Cytometric Bead Array (CBA) para citoquinas humanas Th1/Th2/Th17 (IFN-γ, TNF-α, IL-10, IL-6, IL-2, IL-17 and IL-4). IgG total y las subclases IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 fueron medidas por ELISA indirecto. Asintomáticos (ASIN) fueron definidos como individuos que mostraron linfoproliferación a pesar de no tener enfermedad. Ellos representaron el 54% de aquellos que visitaron áreas endémicas (mediana IE = 4.70). ASIN mostraron bajos niveles de IFN-γ, TNF-α e IL-10 (valores de mediana = 18.60, 6.83 y 31.50, respectivamente), pero con una relación notablemente baja de IFNγ/IL-10 (mediana = 0.32) (p<0.05, cuando fue comparado con los controles). ELISA para las subclases IgG mostraron que IgG3 e IgG1 fueron detectados en 40% y 6.7% de los ASIN, respectivamente. Los niveles de las citoquinas y de anticuerpos fueron considerablemente menores a los correspondientes valores en pacientes LM y LC (p<0.01). Se encontró una respuesta pro-inflamatoria exacerbada en LC y LM (valores de mediana: IE = 77.60 and 22.20; IFN-γ = 3259.48 y 4,673.70; TNF-α = 66.30 y 155.90; IFN-γ/IL-10 ratio = 61.27 y 64.30) respectivamente. Anticuerpos IgG1 e IgG3 fueron detectados en la mayoría de las muestras LCy LM ((100% y 83.3%, respectivamente). La respuesta inmune en ASIN estuvo caracterizada por una respuesta moderada tanto en proliferación celular como en la producción de IFN-γ y TNF-α cuando fue comparada con LC y LM, a pesar de una producción similar de IL-10 en todos los grupos. Además, es interesante notar la presencia de IgG3 y la ausencia de IgG1 en ASIN, mientras que ambos están presentes en pacientes LC y LM. Este hecho puede sugerir que otros factores diferentes de IL-10 pueden estar involucrados en la respuesta Th1 en ASIN.