Estandarización del Ensayo de Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (ELISA) para la detección de la proteína granular del eosinófilo EDN en muestras de suero humanas

Abstract

Taenia solium es un platelminto causante de teniasis humana y cisticercosis en humanos y cerdos. La neurocisticercosis (NCC) se desarrolla cuando las larvas (quistes) infectan el sistema nervioso central. El tratamiento antihelmíntico de NCC lleva a los quistes a su degeneración y muerte, lo que frecuentemente está asociado a una fuerte respuesta inflamatoria en el hospedero y la presentación de síntomas. La sintomatología de la NCC incluye cuadros graves de ataques epilépticos e hipertensión intracraneal. El tratamiento de NCC consiste de una combinación de antihelmíntico y antiinflamatorio. Los antiinflamatorios utilizados son corticoesteroides, principalmente dexametasona, que inhibe la activación de los eosinófilos (vía IL-5, TNF-α). En NCC porcina se han observado infiltrados de eosinófilos alrededor de los quistes. Los eosinófilos son leucocitos que actúan liberando el contenido de sus gránulos, principalmente proteínas citotóxicas (Neurotoxina Derivada del eosinófilo - EDN, Proteína Principal del Eosinófilo -MBP, Proteína Catiónica del eosinófilo -ECP y Peroxidasa del Eosinófilo -EPX) y una gran cantidad de citoquinas. En tejidos, MBP y EPX producen principalmente induración y eritemas con infiltración celular moderada, mientras que EDN y ECP son capaces de alterar la integridad de los tejidos y causar inflamación, además de su neurotoxicidad. Adicionalmente, EDN y ECP poseen actividad RNasa. EDN fue seleccionada para este estudio debido a sus propiedades neurotóxicas y a que sus particularidades facilitan su detección en ensayos de ELISA: menor basicidad y menor número de argininas y cisteínas. Las concentraciones de anticuerpos y las condiciones de las muestras para un ensayo de ELISA fueron optimizadas, y este ensayo se utilizó para detectar y cuantificar la proteína granular del eosinófilo EDN en 10 muestras de suero de pacientes con diferentes manifestaciones de NCC. Se discute la posible inhibición, por la administración del glucocorticoide dexametasona como tratamiento antinflamatorio, de los niveles de EDN de pacientes con NCC vesicular parenquimal que fueron similares a los niveles en muestras de suero de individuos sanos, además del comportamiento de EDN en la NCC racemosa y tras la formación de calcificaciones quísticas, que tienen niveles elevados de EDN. Finalmente, se comenta el potencial de monitorear la evolución de EDN, cuya liberación depende directamente de las condiciones del tratamiento, en el manejo de la NCC, y de su aporte en el estudio de la parte del tratamiento no dirigido a eliminar al parásito.