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Clonamiento y expresión de la proteína tipo tripsina TsAg5 de Taenia solium, con actividad proteolítica, en un sistema de expresión de células de insecto para su potencial uso en el inmunodiagnóstico de cisticercosis porcina

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dc.contributor.advisor Zimic Peralta, Mirko Juan es_ES
dc.contributor.advisor Pajuelo Travezaño, Mónica Jehnny es_ES
dc.contributor.advisor Sheen Cortavarría, Patricia es_ES
dc.contributor.author Luis Lam, Sueline es_ES
dc.date.accessioned 2023-05-04T22:29:20Z
dc.date.available 2023-05-04T22:29:20Z
dc.date.issued 2023
dc.identifier.other 65100 es_ES
dc.identifier.uri https://hdl.handle.net/20.500.12866/13474
dc.description.abstract La cisticercosis porcina es una enfermedad causada por la ingesta de huevos de Taenia solium y su conversión en oncósferas. Las oncósferas penetran el torrente sanguíneo diseminándose en diversos tejidos. La sintomatología depende del sitio en donde se alojen. Los cerdos afectados muchas veces no muestran sintomatología debido al poco tiempo de vida que tienen antes de su sacrificio, por lo que fácilmente pueden diseminar la enfermedad al actuar como hospederos intermediarios en el ciclo de vida del parásito. El diagnóstico de cisticercosis porcina está basado en la observación de los cisticercos durante la necropsia de las carcasas y a través de la palpación de las larvas en la base de la lengua, estas son pruebas complicadas de hacer debido a que necesitan personal entrenado. Estas pruebas se apoyan de pruebas serológicas como la LL-GP EITB, que tiene moderada sensibilidad (77.37%) y moderada especificidad (76.4%) de diagnóstico, y utiliza un antígeno glicoproteico obtenido de cerdos infectados. Es por esto, que se está buscando proteínas antigénicas que faciliten la detección de anticuerpos utilizando pruebas serológicas y que puedan ser producidas de manera recombinante. TsAg5 ha sido detectada en el fluido de quistes y en antígenos de excreción/secreción de T. solium. TsAg5 expresada en un sistema procariote, sin modificaciones post traduccionales, mostró una sensibilidad moderada para detectar neurocisticercosis y actividad enzimática marginal. En este estudio se expresó TsAg5 en células de insecto, sistema que provee de modificaciones post-traduccionales (ej. glicosilaciones), antigenicidad y correcto plegamiento, generándose proteínas funcionales con actividad enzimática tipo tripsina. Además, se comprobó su antigenicidad con sueros de cerdos con cisticercosis a través de western inmunoblot. es_ES
dc.description.abstract Porcine cysticercosis is a disease caused by the ingestion of Taenia solium eggs and their conversion intro oncospheres. Oncospheres penetrate the bloodstream disseminating in various tissues, The symptomatology depends on the place they deposit. Affected pigs often do not show symptoms due to their short lifespan before slaughter, so they can easily spread the disease by acting as intermediate hosts in the parasite’s life cycle. The diagnosis of porcine cysticercosis is based on the observation of the cysts during the necropsy of pig carcasses and through the palpation of the larvae at the base of the tongue, which are complicated tests to perform because they require trained staff. These tests are supported by serological tests such as immunoelectrotransferblot with affinity to lentil lectin glycoproteins (LL-GP EITB) due to its moderate sensitivity (77.37%) and specificity (76.4%) to diagnose it, however this is a test that depends on infected pigs to obtain the glycoproteic antigen. This is the reason we are looking for proteins that are easy to detect using serological tests and can be produced by modern methodologies such as recombinant techniques. TsAg5 has been detected in cyst fluid and excretion/secretion antigens of T. solium, and has been expressed in a prokaryotic system, without post-translational modifications, which showed a moderate sensitivity for detecting neurocysticercosis and a marginal enzyme activity. In this study, TsAg5 was expressed in insect cells, a system that provides post-translational modifications (e.g., glycosylation), antigenicity and correct folding, generating functional proteins with trypsin-like enzymatic activity. In addition, its antigenicity was verified with pigs’ sera with cysticercosis through western immunoblot. es_ES
dc.format application/pdf es_ES
dc.language.iso spa es_ES
dc.publisher Universidad Peruana Cayetano Heredia es_ES
dc.rights info:eu-repo/semantics/openAccess es_ES
dc.rights.uri https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es es_ES
dc.subject Cisticercosis Porcina es_ES
dc.subject TsAg5 es_ES
dc.subject Actividad Enzimática Tipo Tripsina es_ES
dc.subject Expresión de Proteínas es_ES
dc.subject Inmunodiagnóstico. es_ES
dc.title Clonamiento y expresión de la proteína tipo tripsina TsAg5 de Taenia solium, con actividad proteolítica, en un sistema de expresión de células de insecto para su potencial uso en el inmunodiagnóstico de cisticercosis porcina es_ES
dc.type info:eu-repo/semantics/masterThesis es_ES
thesis.degree.name Maestro en Bioquímica y Biología Molecular es_ES
thesis.degree.grantor Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro es_ES
thesis.degree.discipline Bioquímica y Biología Molecular es_ES
dc.publisher.country PE es_ES
dc.subject.ocde http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03 es_ES
dc.subject.ocde http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.07 es_ES
dc.subject.ocde http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.08 es_ES
renati.author.dni 43007208
renati.advisor.orcid https://orcid.org/0000-0002-7203-8847 es_ES
renati.advisor.orcid https://orcid.org/0000-0003-3662-2250 es_ES
renati.advisor.orcid https://orcid.org/0000-0002-7118-9301 es_ES
renati.advisor.dni 07620624
renati.advisor.dni 10518111
renati.advisor.dni 09541127
renati.type http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis es_ES
renati.level http://purl.org/pe-repo/renati/nivel#maestro es_ES
renati.discipline 917067 es_ES
renati.juror Herrera Velit, Rosa Patricia es_ES
renati.juror De Stefano Beltrán, Luis Julio César es_ES
renati.juror Clark Leza, Daniel es_ES


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