Clonamiento y expresión de la proteína tipo tripsina TsAg5 de Taenia solium, con actividad proteolítica, en un sistema de expresión de células de insecto para su potencial uso en el inmunodiagnóstico de cisticercosis porcina

Luis Lam, Sueline

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Maestría en Bioquímica y Biología Molecular
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dc.contributor.advisor	Zimic Peralta, Mirko Juan	es_ES
dc.contributor.advisor	Pajuelo Travezaño, Mónica Jehnny	es_ES
dc.contributor.advisor	Sheen Cortavarría, Patricia	es_ES
dc.contributor.author	Luis Lam, Sueline	es_ES
dc.date.accessioned	2023-05-04T22:29:20Z
dc.date.available	2023-05-04T22:29:20Z
dc.date.issued	2023
dc.identifier.other	65100	es_ES
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12866/13474
dc.description.abstract	La cisticercosis porcina es una enfermedad causada por la ingesta de huevos de Taenia solium y su conversión en oncósferas. Las oncósferas penetran el torrente sanguíneo diseminándose en diversos tejidos. La sintomatología depende del sitio en donde se alojen. Los cerdos afectados muchas veces no muestran sintomatología debido al poco tiempo de vida que tienen antes de su sacrificio, por lo que fácilmente pueden diseminar la enfermedad al actuar como hospederos intermediarios en el ciclo de vida del parásito. El diagnóstico de cisticercosis porcina está basado en la observación de los cisticercos durante la necropsia de las carcasas y a través de la palpación de las larvas en la base de la lengua, estas son pruebas complicadas de hacer debido a que necesitan personal entrenado. Estas pruebas se apoyan de pruebas serológicas como la LL-GP EITB, que tiene moderada sensibilidad (77.37%) y moderada especificidad (76.4%) de diagnóstico, y utiliza un antígeno glicoproteico obtenido de cerdos infectados. Es por esto, que se está buscando proteínas antigénicas que faciliten la detección de anticuerpos utilizando pruebas serológicas y que puedan ser producidas de manera recombinante. TsAg5 ha sido detectada en el fluido de quistes y en antígenos de excreción/secreción de T. solium. TsAg5 expresada en un sistema procariote, sin modificaciones post traduccionales, mostró una sensibilidad moderada para detectar neurocisticercosis y actividad enzimática marginal. En este estudio se expresó TsAg5 en células de insecto, sistema que provee de modificaciones post-traduccionales (ej. glicosilaciones), antigenicidad y correcto plegamiento, generándose proteínas funcionales con actividad enzimática tipo tripsina. Además, se comprobó su antigenicidad con sueros de cerdos con cisticercosis a través de western inmunoblot.	es_ES
dc.description.abstract	Porcine cysticercosis is a disease caused by the ingestion of Taenia solium eggs and their conversion intro oncospheres. Oncospheres penetrate the bloodstream disseminating in various tissues, The symptomatology depends on the place they deposit. Affected pigs often do not show symptoms due to their short lifespan before slaughter, so they can easily spread the disease by acting as intermediate hosts in the parasite’s life cycle. The diagnosis of porcine cysticercosis is based on the observation of the cysts during the necropsy of pig carcasses and through the palpation of the larvae at the base of the tongue, which are complicated tests to perform because they require trained staff. These tests are supported by serological tests such as immunoelectrotransferblot with affinity to lentil lectin glycoproteins (LL-GP EITB) due to its moderate sensitivity (77.37%) and specificity (76.4%) to diagnose it, however this is a test that depends on infected pigs to obtain the glycoproteic antigen. This is the reason we are looking for proteins that are easy to detect using serological tests and can be produced by modern methodologies such as recombinant techniques. TsAg5 has been detected in cyst fluid and excretion/secretion antigens of T. solium, and has been expressed in a prokaryotic system, without post-translational modifications, which showed a moderate sensitivity for detecting neurocysticercosis and a marginal enzyme activity. In this study, TsAg5 was expressed in insect cells, a system that provides post-translational modifications (e.g., glycosylation), antigenicity and correct folding, generating functional proteins with trypsin-like enzymatic activity. In addition, its antigenicity was verified with pigs’ sera with cysticercosis through western immunoblot.	es_ES
dc.format	application/pdf	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Peruana Cayetano Heredia	es_ES
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es_ES
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es	es_ES
dc.subject	Cisticercosis Porcina	es_ES
dc.subject	TsAg5	es_ES
dc.subject	Actividad Enzimática Tipo Tripsina	es_ES
dc.subject	Expresión de Proteínas	es_ES
dc.subject	Inmunodiagnóstico.	es_ES
dc.title	Clonamiento y expresión de la proteína tipo tripsina TsAg5 de Taenia solium, con actividad proteolítica, en un sistema de expresión de células de insecto para su potencial uso en el inmunodiagnóstico de cisticercosis porcina	es_ES
dc.type	info:eu-repo/semantics/masterThesis	es_ES
thesis.degree.name	Maestro en Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
thesis.degree.grantor	Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro	es_ES
thesis.degree.discipline	Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
dc.publisher.country	PE	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.07	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.08	es_ES
renati.author.dni	43007208
renati.advisor.orcid	https://orcid.org/0000-0002-7203-8847	es_ES
renati.advisor.orcid	https://orcid.org/0000-0003-3662-2250	es_ES
renati.advisor.orcid	https://orcid.org/0000-0002-7118-9301	es_ES
renati.advisor.dni	07620624
renati.advisor.dni	10518111
renati.advisor.dni	09541127
renati.type	http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis	es_ES
renati.level	http://purl.org/pe-repo/renati/nivel#maestro	es_ES
renati.discipline	917067	es_ES
renati.juror	Herrera Velit, Rosa Patricia	es_ES
renati.juror	De Stefano Beltrán, Luis Julio César	es_ES
renati.juror	Clark Leza, Daniel	es_ES