Identificación de aptámeros que reconocen péptidos de Trypanosoma cruzi

Peñaranda Manrique, Katherin Lizet

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Maestría en Bioquímica y Biología Molecular
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dc.contributor.advisor	Verástegui Pimentel, Manuela Reneé	es_ES
dc.contributor.advisor	Milón Mayer, Pohl Luis	es_ES
dc.contributor.author	Peñaranda Manrique, Katherin Lizet	es_ES
dc.date.accessioned	2018-03-01T14:59:39Z
dc.date.available	2018-03-01T14:59:39Z
dc.date.issued	2018
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12866/1407
dc.description.abstract	El Mal de Chagas es una enfermedad infecciosa que genera una gran morbilidad, con aproximadamente 6 millones de infectados mundialmente y 2 millones de personas en riesgo de infección en el Perú. A pesar de que los determinantes clínicos de esta enfermedad han sido muy estudiados, la detección del parásito causante de la enfermedad de Chagas sigue siendo un desafío. En este trabajo se emplearon técnicas bioinformáticas y de evolución in vitro (SELEX) para identificar posibles nuevos biomarcadores y desarrollar aptámeros como nuevos biosensores. Se identificaron diez proteínas altamente expresadas como potenciales biomarcadores, siendo seleccionada como la mejor candidata la proteína codificada por el gen TcCLB.510323.60. Cinco péptidos (Tc1-Tc5) generados a partir de esta proteína se utilizaron para desarrollar aptámeros mediante la técnica de SELEX. Se identificaron secuencias de ADN con un motivo rico en guaninas, de las cuales cinco evidenciaron unión específica con el péptido Tc1. Un ensayo tipo ELISA indicó cualitativamente la capacidad de unión de estas secuencias de ADN al péptido biomarcador y a lisados de cultivos de T. cruzi, confirmándose así su condición de aptámeros. Los aptámeros fueron capaces de unir el péptido TC1 diferencialmente (p<0.05) y mostraron reactividades 2 a 3 veces mayores que el cut-off establecido en lisados (0.071196 para proteína soluble total y 0.082576 para proteína de membrana). Los ensayos con lisados crudos de T. cruzi sugieren la presencia de la proteína codificada por el gen TcCLB.510323.60 en la membrana del parásito. Estos aptámeros podrían ser utilizados para desarrollar un ensayo de detección directa de T. cruzi en muestras biológicas como también para enriquecer muestras con una baja carga parasitaria.	es_ES
dc.format	application/pdf	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Peruana Cayetano Heredia	es_ES
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es_ES
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es	es_ES
dc.subject	Aptámeros de Péptidos	es_ES
dc.subject	Aptámeros de Nucleótidos	es_ES
dc.subject	Técnica SELEX de Producción de Aptámeros	es_ES
dc.subject	Trypanosoma cruzi	es_ES
dc.subject	Enfermedad de Chagas	es_ES
dc.subject	Técnicas Biosensibles	es_ES
dc.subject	Biomarcadores	es_ES
dc.title	Identificación de aptámeros que reconocen péptidos de Trypanosoma cruzi	es_ES
dc.type	info:eu-repo/semantics/masterThesis	es_ES
thesis.degree.name	Maestro en Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
thesis.degree.grantor	Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro	es_ES
thesis.degree.discipline	Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
dc.publisher.country	PE	es_ES
dc.subject.ocde	https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03	es_ES
renati.type	http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis	es_ES
renati.level	http://purl.org/pe-repo/renati/level#maestro	es_ES
renati.discipline	917067	es_ES