Evaluación de la actividad quimiotáctica y el potencial invasivo de una línea celular de cáncer de mama en un modelo de tejido descelularizado

Perez Tulich, Luz Narciza Mercedes

dc.contributor.advisor	Cabello Napuri, Marco Antonio Isaias	es_ES
dc.contributor.advisor	Valdivia Silva, Julio Ernesto	es_ES
dc.contributor.author	Perez Tulich, Luz Narciza Mercedes	es_ES
dc.date.accessioned	2024-07-08T17:26:09Z
dc.date.available	2024-07-08T17:26:09Z
dc.date.issued	2024
dc.identifier.other	206107	es_ES
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12866/15618
dc.description.abstract	La quimiotaxis es el movimiento de las células desde un gradiente de menor concentración a otro de mayor concentración de una sustancia soluble, está presente en la embriogénesis, diferenciación celular, regeneración de heridas y la metástasis de tumores. En la invasión celular se requiere que las células migren a través de la matriz extracelular, la cual es degradada por la metaloproteinasas de matriz, dirigiéndose luego a una nueva ubicación. Tanto las células normales como las tumorales pueden migrar en respuesta a estímulos inflamatorios. El objetivo de este proyecto es evaluar el hidrogel elaborado a partir de la matriz extracelular descelularizada del corazón de cerdo como modelo para evaluar la migración, invasión y quimiotaxis de la línea de cáncer de mama MCF-7. Para lo cual se descelularizó el corazón de cerdo para obtener una matriz extracelular rica en colágeno tipo I y IV. La presencia del material nuclear en la matriz descelularizada fue evaluada en base a la concentración de ADN en un nanodrop, con el número de núcleos con tinción DAPI, y cortes histológicos con tinciones de Hematoxilina-Eosina, Tricrómica de Masson y microscopía electrónica. Para la obtención del hidrogel la matriz obtenida se convirtió en polvo mediante el uso de nitrógeno líquido, luego fue solubilizado con Ácido Acético y neutralizado con Hidróxido de sodio (NaOH). Una vez obtenido el hidrogel se realizaron ensayos de toxicidad, migración celular, invasión y quimiotaxis en transwell. Para el modelo 3D se generaron esferoides que fueron embebidos en el hidrogel obtenido de la matriz extracelular descelularizada (dMEC) para lo cual primero se cultivaron las células MCF-7, luego de obtenida la confluencia se procedió a producir los esferoides en eppendorf mediante centrifugación, luego de tres días en incubadora a 37°C y 5% de CO2, se procedió a retirarlos con ayuda de una micropipeta y colocarlos uno por cada pocillo en una placa de 96, en la cual previamente se colocó nuestro hidrogel o matrigel, según corresponda.	es_ES
dc.description.abstract	Chemotaxis is the movement of cells from a gradient of lower concentration to another of higher concentration of a soluble substance; it is present in embryogenesis, cell differentiation and tumor metastasis. Cell invasion requires cells to migrate through the extracellular matrix, which is degraded by matrix metalloproteinases, then heading to a new location. Both normal and tumor cells can migrate in response to inflammatory stimuli. The objective of this project is to evaluate the hydrogel made from the decellularized extracellular matrix of the pig heart as a model to evaluate the migration, invasion and chemotaxis of the MCF-7 breast cancer line. For which the pig heart was decellularized to obtain an extracellular matrix rich in collagen type I and IV. The presence of nuclear material in the decellularized matrix was evaluated based on the concentration of DNA in a nanodrop, with the number of nuclei with DAPI staining, and histological sections with Hematoxylin-Eosin stains, Masson's Trichrome and electron microscopy. To obtain the hydrogel, the matrix obtained was converted into powder using liquid nitrogen, then it was solubilized with Acetic Acid and neutralized with Sodium Hydroxide (NaOH). Once the hydrogel was obtained, toxicity, cell migration, invasion and chemotaxis tests were carried out in transwell. For the 3D model, spheroids were generated that were embedded in the hydrogel obtained from the decellularized extracellular matrix (dMEC), for which the MCF-7 cells were first cultured. After confluence was obtained, the spheroids were produced in Eppendorf by centrifugation. After three days in an incubator at 37°C and 5% CO2, we proceeded to remove them with the help of a micropipette and place them one for each well in a 96 plate, in which our hydrogel or matrigel was previously placed, as appropriate.	es_ES
dc.format	application/pdf	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Peruana Cayetano Heredia	es_ES
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es_ES
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es	es_ES
dc.subject	Matriz Descelularizada	es_ES
dc.subject	Cáncer de Mama	es_ES
dc.subject	MCF-7	es_ES
dc.subject	Migración	es_ES
dc.subject	Invasión	es_ES
dc.subject	Quimiotaxis	es_ES
dc.subject	Esferoides	es_ES
dc.title	Evaluación de la actividad quimiotáctica y el potencial invasivo de una línea celular de cáncer de mama en un modelo de tejido descelularizado	es_ES
dc.type	info:eu-repo/semantics/masterThesis	es_ES
thesis.degree.name	Maestro en Inmunología	es_ES
thesis.degree.grantor	Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro	es_ES
thesis.degree.discipline	Inmunología	es_ES
dc.publisher.country	PE	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.01	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.01.03	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.04.04	es_ES
renati.author.dni	44602037
renati.advisor.orcid	https://orcid.org/0000-0002-8059-4595	es_ES
renati.advisor.orcid	https://orcid.org/0000-0002-7061-3756	es_ES
renati.advisor.dni	41599624
renati.advisor.dni	23994395
renati.level	https://purl.org/pe-repo/renati/level#maestro	es_ES
renati.discipline	021207	es_ES
renati.juror	Neyra Chagua, Víctor Manuel	es_ES
renati.juror	Cerón Tello, Willy Manuel	es_ES
renati.juror	Marín Sánchez, Obert	es_ES