La comunidad fúngica del tracto digestivo de las larvas de Hermetia illucens representa una fuente de compuestos biológicamente activos con propiedades promisorias antibióticas, ofreciendo alternativas prometedoras a los antibióticos convencionales. Salmonella enterica serovar Pullorum, responsable de la tifoidea aviar, provoca pérdidas económicas en la industria avícola, y los tratamientos con antibióticos contribuyen a la resistencia bacteriana. La aplicación específica contra este patógeno sigue sin ser explorada. El estudio tiene como objetivo llenar vacíos de conocimiento al destacar el potencial de los hongos asociados con H. illucens como fuente de moléculas antibióticas efectivas contra S. enterica serovar Pullorum.La exploración de la actividad sobre S. enterica serovar Pullorum de los hongos aislados del intestino de las larvas de la mosca soldado-negra (BSF) permitió la identificación de un hongo activo. El hongo fue identificado como Aspergillus chevalieri y codificado como HGU11_3. El siguiente paso fue el cultivo líquido a gran escala. Posteriormente, se obtuvo un extracto de acetato de etilo, y su actividad antimicrobiana fue validada a través de bioautografía y microdilución en caldo. Se realizó un fraccionamiento bio-dirigido utilizando cromatografía MPLC. Las fracciones activas fueron analizadas mediante UHPLC/MS. El análisis por espectrometría de masas reveló que las fracciones bioactivas de A. chevalieri estaban compuestas por diketopiperazinas, derivados peptídicos, isocoumarinas, derivados de benzofurano, flavinas, terpenoides y ftalatos. En conclusión, estos hallazgos sugieren un potencial interés terapéutico en las subfracciones bioactivas identificadas, allanando el camino para futuras investigaciones en sus aplicaciones biomédicas y veterinarias.The fungal community of Hermetia illucens larvae’s digestive tract, represents a source of biologically active compounds with potential antibiotic properties, offering promising alternatives to conventional antibiotics. Salmonella enterica serovar Pullorum, responsible for avian typhoid, results in economic losses in the poultry industry, and antibiotic treatments contribute to bacterial resistance. Specific application against this pathogen remains unexplored.The study aims to fill knowledge gaps by highlighting the potential of H. illucens associated fungi as a source of effective antibiotic molecules against S. enterica serovar Pullorum.The exploration of the activity on S. enterica serovar Pullorum of fungi isolated from Black Soldier Fly (BSF) larvae’s gut allowed the identification of an active fungus. The fungus was identified as Aspergillus chevalieri and coded as HGU11_3. The following step was mass liquid cultivation. Subsequently, an ethyl acetate extract was obtained, and its antimicrobial activity was validated through bioautography and broth microdilution. Bio-guided fractionation was carried out using MPLC chromatography. The active fractions were analyzed by UHPLC/MS. Mass spectrometry analysis revealed that the bioactive fractions from A. chevalieri were composed of diketopiperazines, peptide derivatives, isocoumarins, benzofuran derivatives, flavins, terpenoids, and phthalates. In conclusion, thesefindings suggest a potential therapeutic interest in the identified bioactive subfractions, paving the way for future investigations into their biomedical and veterinary applications.