Las condiciones de esterilización recomendadas por el Ministerio de Salud- Perú en el “Manual de Desinfección y Esterilización -2021” son de 121°C por 15 minutos y 134°C por 3 minutos, la biocarga de los materiales hospitalarios a esterilizar incluyen bacterias Gramnegativas portadoras de endotoxinas bacterianas como Escherichia coli y Salmonella enterica, se desconoce si la muerte celular inducida por el vapor mediante la alteración de las estructuras celulares y la coagulación de las proteínas durante la esterilización por autoclave pueda generar la liberación de endotoxinas resistentes a la esterilización que puedan causar efectos que incluyen fiebre, escalofríos, neumonitis tóxica, síntomas respiratorios y en el peor de los casos shock sépticos sobre pacientes con estancia hospitalaria usuarios de estos materiales esterilizados, estos materiales incluyen equipos de curación, equipos de sutura, instrumentación quirúrgica, ropa para sala de operaciones, campos simples y fenestrados, apósitos, etc. Se detectó por el método de Gel-Clot la liberación de endotoxinas bacterianas de inóculos estandarizados de E.coli ATCC8739 y S. enterica ATCC 14028 dispuestos dentro de materiales hospitalarios tras esterilización por autoclave a 121°C por 15 minutos y 134°C por 3 minutos. Los resultados evidencian que en todos los inóculos E.coli y S. enterica sometidos a procesos de esterilización ya sea a 121°C y 134°C se detectó resultados positivos para la liberación de endotoxinas con porcentajes de positividad que varían entre el 11.1% hasta 88.9%, respectivamente; aumentando el porcentaje de positividad de la liberación de endotoxinas en función de la temperatura esterilización y sin impacto por el tipo de bacteria Gram-negativa sometida a esterilización.The sterilization conditions recommended by the Ministry of Health - Peru in the "Disinfection and Sterilization Manual -2021" are 121 ° C for 15 minutes and 134 ° C for 3 minutes, the bioburden of the hospital materials to be sterilized include pathogenic Gramnegative bacteria carriers of bacterial endotoxins such as Escherichia coli and Salmonella enterica, it is unknown whether steam-induced cell death by altering cellular structures and protein coagulation during autoclave sterilization can generate the release of sterilization-resistant endotoxins that can cause effects including fever, chills, toxic pneumonitis, respiratory symptoms and in the worst case septic shock on patients with hospital stay users of these sterilized materials, these materials include healing equipment, suture equipment, surgical instrumentation, operating room clothing, simple and fenestrated fields, dressings, etc. The release of bacterial endotoxins from standardized inoculums of E. coli ATCC8739 and S. enterica ATCC 14028 placed inside hospital materials after autoclaving at 121°C for 15 minutes and 134°C for 3 minutes was evaluated by the Gel-Clot method. The results show that all E. coli and S. enterica inocula subjected to sterilization processes at either 121°C or 134°C showed positive results for endotoxin release, with positivity rates ranging from 11.1% to 88.9%, respectively; the positivity rate for endotoxin release increased depending on the sterilization temperature and was not affected by the type of Gram-negative bacteria subjected to sterilization.