La resistencia antimicrobiana constituye una amenaza global que afecta la salud humana, animal y ambiental. En este contexto, los primates en cautiverio pueden actuar como reservorios de bacterias resistentes, siendo relevantes para la vigilancia epidemiológica y la conservación. El estudio tuvo como objetivo identificar el perfil de resistencia antibiótica en aislados de Escherichia coli productores y no productores de beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) en primates neotropicales de un centro de rescate en el departamento de Madre de Dios, Perú. La población objetivo incluyó 45 individuos del mono aullador rojo (Alouatta sara), de los cuales 44 cumplieron los criterios de inclusión y exclusión. Las muestras fecales se colectaron de manera no invasiva directamente después de la defecación, se conservaron en agar Cary Blair y se transportaron al laboratorio a temperatura de 4ºC. Se aislaron e identificaron cepas de E. coli mediante pruebas bioquímicas y control con cepas ATCC. Se evaluó la producción de BLEE mediante pruebas fenotípicas, y el perfil de resistencia ante 12 antibióticos con el método de disco de difusión. Además, se calcularon el índice MAR y la multirresistencia (MDR) según criterios internacionales. Se detectó una frecuencia de E. coli del 97.7% (43/44), con 85 aislados obtenidos. Sólo un aislado (1.2 %) fue productor de BLEE, presentando resistencia a ocho antibióticos de cinco clases. Los 84 aislados no BLEE mostraron alta sensibilidad (≥ 90 %) a la mayoría de los antibióticos. Se identificó resistencia a tetraciclina (13.1 %), sulfametoxazol-trimetoprima (9.5 %) y cloranfenicol (4.8 %). Cinco aislados (5.9 %) fueron MDR y siete presentaron un índice MAR ≥ 0.2. Aunque la frecuencia de BLEE y multirresistencia fue baja, la detección de resistencia ante antibióticos de importancia en la salud pública evidencia la necesidad de monitoreo continuo con un enfoque de Una Salud en estas poblaciones.Antimicrobial resistance is a global threat affecting human, animal, and environmental health. In this context, captive primates can serve as reservoirs of resistant bacteria, making them relevant for epidemiological surveillance and conservation efforts. This study aimed to identify the antibiotic resistance profile of extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing and non-ESBL-producing Escherichia coli isolates in neotropical primates at a rescue center in Madre de Dios, Peru. The study population consisted of 45 individuals of red howler monkey (Alouatta sara), of which 44 met the inclusion and exclusion criteria. Fecal samples were collected non-invasively directly after defecation, preserved in Cary Blair agar, and transported to the laboratory at a temperature of 4ºC. E. coli strains were isolated and identified using biochemical tests and ATCC control strains. ESBL production was evaluated using phenotypic tests, and the resistance profile against 12 antibiotics, using the disc diffusion method. Additionally, the MAR index and multidrug resistance (MDR) were calculated according to international criteria. The frequency of E. coli was 97.7% (43/44), with 85 isolates obtained. Only one isolate (1.2%) was an ESBL producer, showing resistance to eight antibiotics from five classes. The 84 non-ESBL isolates demonstrated high sensitivity (≥ 90%) to most antibiotics, although resistance to tetracycline (13.1%), sulfamethoxazole-trimethoprim (9.5%), and chloramphenicol (4.8%) was identified. Five isolates (5.9 %) were MDR and seven had a MAR index ≥ 0.2. Although the frequency of ESBL and MDR was low, the detection of resistance to antibiotics relevant to public health highlights the need for continuous monitoring under a One Health approach in these populations.