Universidad Peruana Cayetano Heredia

SELEX para la producción de aptámeros a partir de péptidos de superficie provenientes de proteínas abundantes y secretadas por el quiste de Taenia solium

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dc.contributor.advisor Zimic Peralta, Mirko Juan es_ES
dc.contributor.advisor Milón Mayer, Pohl Luis es_ES
dc.contributor.author Huanachin Carahuanco, Felipe es_ES
dc.date.accessioned 2018-05-24T21:52:09Z
dc.date.available 2018-05-24T21:52:09Z
dc.date.issued 2018
dc.identifier.uri https://hdl.handle.net/20.500.12866/3595
dc.description.abstract La neurocisticercosis es la causa más común de epilepsia adquirida en adultos en el mundo, y una de las enfermedades zoonóticas más importantes asociadas al sistema nervioso central (SNC). La neurocisticercosis se debe al establecimiento del cisticerco de Taenia solium en el SNC del ser humano, actuando éste como hospedero intermediario accidental. Actualmente, se sabe que varias proteínas, usadas ampliamente en diagnóstico, son secretadas por el cisticerco al líquido cefalorraquídeo y, posteriormente, a la sangre. Varias de estas proteínas se encuentran en mayor abundancia en el secretoma del cisticerco. Aunque existen trabajos en la identificación de anticuerpos monoclonales afines a estas proteínas, existen otras metodologías que no han sido aplicadas aún en la neurocisticercosis. Una de estas tecnologías es el uso de aptámeros que se obtienen mediante la selección evolutiva de enriquecimiento de secuencias de ácidos nucleicos de hebra simple (SELEX). Los aptámeros desarrollan alta afinidad por su blanco gracias a interacciones de naturaleza no covalente como, por ejemplo, puentes de hidrógeno, interacciones iónicas, hidrofóbicas y electroestáticas. En el presente trabajo se planteó adaptar una metodología de SELEX para producir aptámeros contra las proteínas abundantes del cisticerco utilizando péptidos superficiales provenientes de dichas proteínas. Se seleccionaron 14 proteínas como buenos blancos para la producción de aptámeros, siendo estos: la familia de 8KDa (Ts18, Ts14, TsRS1, TsRS2 y Ts8B2), GP50, T24, 14-3-3 (e y z), tioredoxin peroxidasa, trypsin-like protein, catepsina L, immunogenic protein Ts11 y la enolasa. De las dos metodologías de SELEX que se probaron, con la metodología SELEX por transcripción in vitro se pudo producir aptámeros para péptidos superficiales de la proteína Ts18var1 en la ronda 10 del SELEX. Esta producción se evidenció satisfactoriamente con la prueba S1, mientras que con el secuenciamiento de las rondas del SELEX se confirmó el enriquecimiento y se identificaron las secuencias enriquecidas. Dentro del secuenciamiento, el aptámero 1R1 mostró un enriquecimiento de 7300 veces en la población de secuencias. Así mismo, mostró afinidad hacia el péptido pepFH_14 proveniente de la proteína TS18var1. La afinidad fue determinada cuantitativamente mediante titulación y se determinó que fue de 0.4 uM. es_ES
dc.format application/pdf es_ES
dc.language.iso spa es_ES
dc.publisher Universidad Peruana Cayetano Heredia es_ES
dc.rights info:eu-repo/semantics/openAccess es_ES
dc.rights.uri https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es es_ES
dc.subject Neurocisticercosis es_ES
dc.subject Taenia solium es_ES
dc.subject Técnica SELEX de Producción de Aptámeros es_ES
dc.subject Aptámeros de Péptidos es_ES
dc.title SELEX para la producción de aptámeros a partir de péptidos de superficie provenientes de proteínas abundantes y secretadas por el quiste de Taenia solium es_ES
dc.type info:eu-repo/semantics/masterThesis es_ES
thesis.degree.name Maestro en Bioquímica y Biología Molecular es_ES
thesis.degree.grantor Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro es_ES
thesis.degree.discipline Bioquímica y Biología Molecular es_ES
dc.publisher.country PE es_ES
dc.subject.ocde https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03 es_ES
renati.type http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis es_ES
renati.level http://purl.org/pe-repo/renati/level#maestro es_ES
renati.discipline 917067 es_ES


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info:eu-repo/semantics/openAccess Excepto si se señala otra cosa, la licencia del ítem se describe como info:eu-repo/semantics/openAccess

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