SELEX para la producción de aptámeros a partir de péptidos de superficie provenientes de proteínas abundantes y secretadas por el quiste de Taenia solium

Huanachin Carahuanco, Felipe

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Maestría en Bioquímica y Biología Molecular
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dc.contributor.advisor	Zimic Peralta, Mirko Juan	es_ES
dc.contributor.advisor	Milón Mayer, Pohl Luis	es_ES
dc.contributor.author	Huanachin Carahuanco, Felipe	es_ES
dc.date.accessioned	2018-05-24T21:52:09Z
dc.date.available	2018-05-24T21:52:09Z
dc.date.issued	2018
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12866/3595
dc.description.abstract	La neurocisticercosis es la causa más común de epilepsia adquirida en adultos en el mundo, y una de las enfermedades zoonóticas más importantes asociadas al sistema nervioso central (SNC). La neurocisticercosis se debe al establecimiento del cisticerco de Taenia solium en el SNC del ser humano, actuando éste como hospedero intermediario accidental. Actualmente, se sabe que varias proteínas, usadas ampliamente en diagnóstico, son secretadas por el cisticerco al líquido cefalorraquídeo y, posteriormente, a la sangre. Varias de estas proteínas se encuentran en mayor abundancia en el secretoma del cisticerco. Aunque existen trabajos en la identificación de anticuerpos monoclonales afines a estas proteínas, existen otras metodologías que no han sido aplicadas aún en la neurocisticercosis. Una de estas tecnologías es el uso de aptámeros que se obtienen mediante la selección evolutiva de enriquecimiento de secuencias de ácidos nucleicos de hebra simple (SELEX). Los aptámeros desarrollan alta afinidad por su blanco gracias a interacciones de naturaleza no covalente como, por ejemplo, puentes de hidrógeno, interacciones iónicas, hidrofóbicas y electroestáticas. En el presente trabajo se planteó adaptar una metodología de SELEX para producir aptámeros contra las proteínas abundantes del cisticerco utilizando péptidos superficiales provenientes de dichas proteínas. Se seleccionaron 14 proteínas como buenos blancos para la producción de aptámeros, siendo estos: la familia de 8KDa (Ts18, Ts14, TsRS1, TsRS2 y Ts8B2), GP50, T24, 14-3-3 (e y z), tioredoxin peroxidasa, trypsin-like protein, catepsina L, immunogenic protein Ts11 y la enolasa. De las dos metodologías de SELEX que se probaron, con la metodología SELEX por transcripción in vitro se pudo producir aptámeros para péptidos superficiales de la proteína Ts18var1 en la ronda 10 del SELEX. Esta producción se evidenció satisfactoriamente con la prueba S1, mientras que con el secuenciamiento de las rondas del SELEX se confirmó el enriquecimiento y se identificaron las secuencias enriquecidas. Dentro del secuenciamiento, el aptámero 1R1 mostró un enriquecimiento de 7300 veces en la población de secuencias. Así mismo, mostró afinidad hacia el péptido pepFH_14 proveniente de la proteína TS18var1. La afinidad fue determinada cuantitativamente mediante titulación y se determinó que fue de 0.4 uM.	es_ES
dc.format	application/pdf	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Peruana Cayetano Heredia	es_ES
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es_ES
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es	es_ES
dc.subject	Neurocisticercosis	es_ES
dc.subject	Taenia solium	es_ES
dc.subject	Técnica SELEX de Producción de Aptámeros	es_ES
dc.subject	Aptámeros de Péptidos	es_ES
dc.title	SELEX para la producción de aptámeros a partir de péptidos de superficie provenientes de proteínas abundantes y secretadas por el quiste de Taenia solium	es_ES
dc.type	info:eu-repo/semantics/masterThesis	es_ES
thesis.degree.name	Maestro en Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
thesis.degree.grantor	Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro	es_ES
thesis.degree.discipline	Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
dc.publisher.country	PE	es_ES
dc.subject.ocde	https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03	es_ES
renati.type	http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis	es_ES
renati.level	http://purl.org/pe-repo/renati/level#maestro	es_ES
renati.discipline	917067	es_ES