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Anticuerpos de cadena única de alpaca para la detección de antígenos de Fasciola hepática

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dc.contributor.author Barreto, T.
dc.contributor.author Alfonso, Y.
dc.contributor.author Lafaye, P.
dc.contributor.author García Lazaro, M. D. P.
dc.contributor.author Agueda Perez, L.
dc.contributor.author Herrera Velit, P.
dc.contributor.author Espinoza, J. R.
dc.date.accessioned 2019-03-05T15:23:32Z
dc.date.available 2019-03-05T15:23:32Z
dc.date.issued 2018
dc.identifier.uri https://hdl.handle.net/20.500.12866/5910
dc.description.abstract Objetivo. Producir anticuerpos recombinantes de cadena única de alpaca que se unan con alta afinidad y especificidad al antígeno excretado-secretado (ES) de Fasciola hepatica para el desarrollo de tecnologías nuevas de diagnóstico de fascioliasis humana y animal. Materiales y métodos. Se ha construido una genoteca de cADNde los dominios variables de anticuerpos de cadena única pesada, conocidos como VHH, a partir de células mononucleares de sangre periférica de una alpaca inmunizada con el antígeno ES de F. hepatica. La genoteca fue tamizada con el antígeno ES por despliegue diferencial de fagos (phage display), seleccionando diez VHH que se unen específicamente a ES. El VHH anti ES fue clonado en un vector de expresión, la proteína recombinante (VHH-ES1) de 15,3 kDa fue producida por fermentación en E. coli y purificada a homogeneidad por cromatografía de afinidad. La unión del VHH-ES1 al antígeno ES fue evaluada por ELISA usando VHHES1 como anticuerpo de captura, antisuero policlonal anti-ES de conejo y conjugado anti IgG de conejo con peróxidasa de rábano. Resultados. Se ha identificado y producido un VHH-ES1 recombinante que se une al antígeno ES (VHH-ES1) que correspondía a un anticuerpo de la subclase IgG2 de bisagra larga. La unión del anticuerpo VHH-ES1 al antígeno muestra linealidad respecto a la concentración de ES en el rango de 50-5000 ng/mL y el valor límite de detección del antígeno está en el rango de 30-170 ng/mL de ES (R2=0,99). Conclusión. El VHH-ES1 se une con afinidad y especificidad al antígeno ES de F. hepatica y es un anticuerpo promisorio a evaluar para el desarrollo de nuevas tecnologías de diagnóstico de fascioliasis. es_PE
dc.language.iso spa
dc.publisher Instituto Nacional de Salud
dc.relation.ispartof urn:issn:1726-4642
dc.rights info:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.rights.uri https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es
dc.subject Anticuerpos de Dominio Único es_PE
dc.subject Fascioliasis es_PE
dc.subject Anticuerpos es_PE
dc.subject Camélidos del Nuevo Mundo es_PE
dc.subject Perú es_PE
dc.title Anticuerpos de cadena única de alpaca para la detección de antígenos de Fasciola hepática es_PE
dc.title.alternative Single-chain antibodies from alpaca for the detection of Fasciola hepatica antigens en_US
dc.type info:eu-repo/semantics/article
dc.identifier.doi https://doi.org/10.17843/rpmesp.2018.354.3101
dc.subject.ocde https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.02.00 es_PE
dc.subject.ocde https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.05


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