Estandarización de una técnica de complementación del gen pncA en Mycobacterium tuberculosis pncA-knockout: herramienta para el estudio de la relación entre mutaciones en pncA y parámetros fenotípicos

Cauna Orocollo, Yudith

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dc.contributor.advisor	Zimic Peralta, Mirko Juan	es_ES
dc.contributor.author	Cauna Orocollo, Yudith	es_ES
dc.date.accessioned	2019-07-09T14:34:21Z
dc.date.available	2019-07-09T14:34:21Z
dc.date.issued	2019
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12866/6972
dc.description.abstract	Mutaciones en el gen pncA son la mayor causa de resistencia a pirazinamida (PZA), pero existen mecanismos alternativos que también aportan resistencia. El objetivo del estudio fue estandarizar la técnica de complementación del gen pncA en Mycobacterium tuberculosis H37Rv pncA-KO para evaluar el efecto de las mutaciones en el gen pncA sobre parámetros fenótipicos, en un escenario controlado por la variabilidad genética de los aislados clínicos de donde provienen los genes pncA mutantes. Se generaron cepas complementadas con genes pncA WT y mutantes D49N, H51R, G78C y F94L a través del sistema de expresión pNIT-1 para evaluar la actividad PZAsa mediante la prueba de Wayne cuantitativa, nivel de expresión del gen pncA y susceptibilidad a PZA usando concentraciones graduales de PZA en condiciones no inducida e inducida. El sistema de expresión pNIT-pncA restauró el fenotipo de la cepa pncA-KO y los plásmidos se mantuvieron estables intracelularmente durante el período de observación que duró 18 semanas. Los niveles de expresión basal resultaron constantes y similares al de la cepa H37Rv. La cepa pncA WT complementada mostró actividad PZAsa y Concentración Mínima Inhibitoria de PZA similar al de la cepa H37Rv. Sin embargo, las cepas pncA mutantes complementadas fueron resistentes a PZA en ambas condiciones y la sobreexpresión de los genes pncA mutantes permitió verificar la pérdida total o parcial de la actividad PZAsa.	es_ES
dc.format	application/pdf	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Peruana Cayetano Heredia	es_ES
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es_ES
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es	es_ES
dc.subject	Mutación	es_ES
dc.subject	Mutagénesis	es_ES
dc.subject	Pirazinamida	es_ES
dc.subject	Mycobacterium tuberculosis	es_ES
dc.subject	Antituberculosos	es_ES
dc.title	Estandarización de una técnica de complementación del gen pncA en Mycobacterium tuberculosis pncA-knockout: herramienta para el estudio de la relación entre mutaciones en pncA y parámetros fenotípicos	es_ES
dc.type	info:eu-repo/semantics/masterThesis	es_ES
thesis.degree.name	Maestro en Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
thesis.degree.grantor	Universidad Peruana Cayetano Heredia. Escuela de Posgrado Víctor Alzamora Castro	es_ES
thesis.degree.discipline	Bioquímica y Biología Molecular	es_ES
dc.publisher.country	PE	es_ES
dc.subject.ocde	https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03	es_ES
renati.type	http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis	es_ES
renati.level	http://purl.org/pe-repo/renati/level#maestro	es_ES
renati.discipline	917067	es_ES