La leptospirosis es una enfermedad zoonótica de distribución mundial que afecta tanto a humanos como a animales y que repercute económicamente a los países desarrollados y en vías de desarrollo. La vacunación es la principal medida de prevención de la enfermedad en los canes. El objetivo del presente estudio fue identificar y determinar la frecuencia de la seropositividad a serovares de Leptospira en caninos con diagnóstico clínico presuntivo de leptospirosis, en la Clínica Veterinaria Cayetano Heredia. Se recolectaron 33 muestras de sangre pareadas (muestra aguda y convaleciente), las cuales fueron sometidas a la prueba de Microaglutinación (MAT), en el Laboratorio de Microbiología del Instituto de Medicina Tropical Alexander Von Humboldt (Universidad Peruana Cayetano Heredia). El 18.2% (6/33) de los caninos mostraron seropositividad frente a la prueba del MAT y tenían una historia de última vacunación mayor a 1 año. En el primer muestreo el serogrupo Pyrogenes tuvo una prevalencia del 33.33% (2/6), mientras que en el segundo muestreo fue del 16.66% (1/6). Los serogrupos Canicola y Serjoe mostraron una seroprevalencia del 16.66% (1/6) en el primer muestreo, a diferencia del 33.33% correspondiente al segundo muestreo.