Optimización del proceso de gota colgante para la obtención de "Spherulites" de la enzima pirazinamidasa K48T

Marquez Ocaña, Omayra Patricia

dc.contributor.advisor	Sheen Cortavarria, Patricia	es_ES
dc.contributor.author	Marquez Ocaña, Omayra Patricia	es_ES
dc.date.accessioned	2023-12-14T14:25:31Z
dc.date.available	2023-12-14T14:25:31Z
dc.date.issued	2023
dc.identifier.other	209606	es_ES
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12866/14769
dc.description.abstract	Dentro de la biología moderna, el modelamiento de la estructura tridimensional de las proteínas proporciona información relevante e irremplazable para determinar su función o características. Uno de los métodos más usados es la cristalografía de rayos X; para ello es necesario obtener cristales de proteína. Una de las técnicas más usadas es la difusión por vapor; en la cual una gota de muestra pura y homogénea con precipitante llega a la sobresaturación. Se pueden obtener diferentes resultados aparte de cristales, como la formación de Spherulites; que son gotas de proteína concentrada y uniforme. Las Spherulites presentan un buen punto de inicio en la optimización del proceso de formación de cristales proteicos. En el 2011 se obtuvo un primer cristal y posterior estructura de la enzima pirazinamidasa de Mycobacterium tuberculosis de la cepa H37Rv.Mediante el método de gota colgante, que usa el principio de la difusión de vapor, y MgSO4 como precipitante; sin embargo, nunca se pudo reproducir el resultado con las condiciones determinadas en dicha investigación. En este estudio mediante el método de gota colgante se determinó cuáles son las mejores condiciones para obtener un estado de Spherulite de la pirazinamidasa mutante K48T. Las Spherulites de pirazinamidasa K48T fueron obtenidas a 1.5M de MgSO4, 100 mM de BME, 5, 10 y 20mg/ml de PZAsa a pH 6.5 de buffer Bis TRIS a 25°C.	es_ES
dc.description.abstract	Within modern biology, the modeling of the three-dimensional structure of proteins provides relevant and irreplaceable information to determine their function or characteristics. One of the most used methods is X-ray crystallography; for this it is necessary to obtain protein crystals; by methods such as vapor diffusion. In which a drop of pure and homogeneous sample with precipitant reaches supersaturation and changes are observed in the drop. Different results can be obtained apart from crystals, such as the formation of Spherulites, concentrated and uniform protein droplets, which present a good starting point in optimizing the process of protein crystal formation. In 2011, a first crystal and subsequent structure of the Mycobacterium tuberculosis pyrazinamidase enzyme of the H37Rv strain was obtained, using the hanging drop method and MgSO4 as precipitant; however, the result could never be reproduced with the conditions determined in that investigation. In this study using the hanging drop method will be extended are the best conditions to obtain a Spherulite state of the K48T mutant pyrazinamidase. Pyrazinamidase K48T Spherulites were obtained in 1.5M MgSO4, 100 mM BME, 5, 10 and 20mg/ml PZAsa in pH 6.5 Bis TRIS buffer at 25°C.	es_ES
dc.format	application/pdf	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Peruana Cayetano Heredia	es_ES
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es_ES
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/deed.es	es_ES
dc.subject	M. tuberculosis	es_ES
dc.subject	Spherulite	es_ES
dc.subject	Gota Colgante	es_ES
dc.subject	Pirazinamidasa	es_ES
dc.title	Optimización del proceso de gota colgante para la obtención de "Spherulites" de la enzima pirazinamidasa K48T	es_ES
dc.type	info:eu-repo/semantics/bachelorThesis	es_ES
thesis.degree.name	Licenciado en Biología	es_ES
thesis.degree.grantor	Universidad Peruana Cayetano Heredia. Facultad de Ciencias e Ingeniería Alberto Cazorla Talleri	es_ES
thesis.degree.discipline	Biología	es_ES
dc.publisher.country	PE	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.01	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.01.05	es_ES
dc.subject.ocde	http://purl.org/pe-repo/ocde/ford#3.03.08	es_ES
renati.author.dni	71950089
renati.advisor.orcid	https://orcid.org/0000-0002-7118-9301	es_ES
renati.advisor.dni	09541127
renati.type	http://purl.org/pe-repo/renati/type#tesis	es_ES
renati.level	http://purl.org/pe-repo/renati/nivel#tituloProfesional	es_ES
renati.discipline	511206	es_ES
renati.juror	Maita Malpartida, Holger	es_ES
renati.juror	Méndez Aranda, Melissa Marlene	es_ES
renati.juror	Tsukayama Cisneros, Pablo	es_ES