La producción de huevos es una fuente importante de proteínas en la alimentación humana. Por esta razón es importante el manejo sanitario, y dentro de ello la administración de los fármacos en dosis adecuada, con el fin de reducir el riesgo de incrementar la resistencia a antimicrobianos (RAM), la cual es vista y combatida desde el enfoque de “Una Salud”, puesto que cada vez los tratamientos son menos eficaces y más escasos, reflejándose en enfermedades y pérdidas económicas. El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia a colistina y a antibióticos betalactámicos en cepas aisladas de Escherichia coli de muestras de heces de gallinas ponedoras. Se tuvo un total de 162 cepas de E. coli aisladas previamente, de las cuales 74 (45.7%) fueron provenientes de agar Mac Conkey con suplementación de colistina y 88 (54.3%) cepas de agar Mac Conkey con suplementación de cefotaxima. Todas las cepas se analizaron por el Método de Disco Combinado (CDT) para determinar cepas de E. coli productoras de Betalactamasas de Espectro Extendido (BLEE) y elución de colistina para determinar cepas resistentes a colistina. Se determinó un total de 109/162 (67.3%) cepas positivas para BLEE y 55/162 (34%) fueron resistentes a colistina. Asimismo, se determinó que 20/162 (12.3%) cepas poseían resistencia a ambos antibióticos. Estos resultados fueron analizados utilizando estadística descriptiva en Microsoft Excel, mostrando que hay una elevada resistencia a estos dos grupos de fármacos. Según lo mostrado se recomendaría realizar una vigilancia activa, ya que, hay un elevado porcentaje de E. coli BLEE positivo y también presentan resistencia a colistina, aunque esta fue prohibida en el año 2019 en el Perú, y sigue circulando bacterias con resistencia a esta, llegando a ser un problema de salud pública debido a que colistina es usado en tratamientos contra bacterias positivas a BLEE en humanos.Egg production is an important source of protein in the human diet. For this reason, health management is important, and within this the administration of drugs in adequate doses, in order to reduce the risk of increasing antimicrobial resistance (AMR), which is seen and combated from the approach of “One Health”, since treatments are increasingly less effective and scarcer, reflected in illnesses and economic losses. The objective of this work was to evaluate resistance to colistin and beta-lactam antibiotics in Escherichia coli strains isolated from fecal samples of laying hens. There were a total of 162 E. coli strains previously isolated, of which 74 (45.7%) came from Mac Conkey agar with colistin supplementation and 88 (54.3%) strains from Mac Conkey agar with cefotaxime supplementation. All strains were analyzed by the combined disk (CDT) method to determine extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing E. coli strains and colistin elution to determine colistin-resistant strains. A total of 109/162 (67.3%) ESBL-positive strains were determined and 55/162 (34%) were resistant to colistin. Likewise, it was determined that 20/162 (12.3%) strains had resistance to both antibiotics. These results were analyzed using descriptive statistics in Microsoft Excel, showing that there is a high resistance to these two groups of drugs. According to what has been shown, it would be recommended to carry out active surveillance, since there is a high percentage of positive ESBL and they also present resistance to colistin, although this was prohibited in 2019 in Peru, and bacteria with resistance to it continue to circulate, becoming a public health problem because colistin is used in treatments against ESBL-positive bacteria in humans.