Los citostáticos son medicamentos utilizados en los tratamientos contra el cáncer y son administrados por la enfermera(o), por ello el profesional de salud debe poseer un correcto conocimiento y práctica (especialidad). En el Perú no se han encontrado investigaciones recientes que desarrollen este tema sumamente importante para el entorno hospitalario. Objetivo: determinar la relación que existe entre el nivel de conocimiento y la práctica del personal de enfermería sobre las medidas de bioseguridad en el manejo de agentes citostáticos en el área de Quimioterapia Ambulatoria del Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas en el 2023. Material y método: el estudio es de tipo cuantitativo, descriptivo y de corte transversal. La población está constituida por 32 enfermeras que laboran en el área de Quimioterapia Ambulatoria del Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas en el 2023. Se utilizó como técnica la encuesta y como instrumentos, dos cuestionarios que evaluaron el nivel de conocimientos y nivel de prácticas, teniendo en cuenta los principios éticos. Resultados: las variables en estudio presentan correlaciones significativas y positivas (rho = 0,87), así como también entre sus dimensiones. Conclusión: el nivel de conocimiento y la práctica del personal de enfermería sobre las medidas de bioseguridad en el manejo de agentes citostáticos se encuentran relacionadas.Cytostatics are medications used in cancer treatments and are administered by the nurse, therefore the health professional must have correct knowledge and practice (specialty). In Peru, no recent research has been found that developed this topic of utmost importance for the hospital environment. Objective: to determine the relationship that exists between the level of knowledge and practice of nursing staff on biosafety measures in the management of cytostatic agents in the Ambulatory Chemotherapy area of the National Institute of Neoplastic Diseases in 2023. Material and method: The study is quantitative, descriptive, cross-sectional. The sample population is made up of 32 nurses who work in the Ambulatory Chemotherapy area of the National Institute of Neoplastic Diseases in 2023. The survey was used as a technique and as instruments, two questionnaires that evaluated the level of knowledge and level of practices, having taken into account ethical principles. Results: the variables under study present significant and positive correlations (rho = 0.87), as well as between their dimensions. Conclusion: the level of knowledge and practice of nursing staff on biosafety measures in the management of cytostatic agents are related.