Objetivo. El objetivo del presente estudio fue determinar la frecuencia de gestantes portadoras de Streptococcus agalactiae en el periodo comprendido entre enero a mayo del 2016 en el Hospital Nacional Cayetano Heredia, así mismo, comparar la frecuencia de acuerdo a la zona de colonización en secreción vaginal y ano-rectal, y explorar la asociación entre las características clínicas y sociodemográficas con ser portador de este microorganismo. Material y Métodos. Se analizaron muestras de secreción vaginal y ano-rectal de 53 gestantes a partir de las 35 semanas de gestación para aislar y posteriormente identificar la presencia de Streptococcus agalactiae de acuerdo al protocolo de procesos estandarizados (crecimiento en medio cultivo, coloración gram, prueba de la catalasa, prueba de CAMP y resistencia a la bacitracina). Resultados. De 53 gestantes evaluadas se identificó Streptococcus agalactiae en 9 de ellas (17%), de las cuales; la colonización solo vaginal fue de 45%, la colonización solo ano-rectal 33% y, la colonización vaginal y ano-rectal 22%. Se presentó una mayor tasa de colonización en gestantes de 35 a 37 semanas de gestación (89%). Conclusiones. Los resultados obtenidos en este estudio, indica que el porcentaje de colonización por Streptococcus agalactiae es considerable, por ello; es recomendable implementar en los centros de salud los protocolos de prevención para este patógeno.