Objetivo: Evaluar la influencia de diferentes tiempos de acondicionamiento (ácido fosfórico al 37 % por 5", 10" y 20") a nivel del esmalte y su efecto en la resistencia adhesiva (RA) con cementos autoadhesivos (CA) sometidos a termociclado (TC). Materiales y métodos: 128 bloques de esmalte bovino de 8 x 4 x 2 mm fueron distribuidos aleatoriamente en 2 cementos: RelyX U200 (XU) y Maxcem Elite (MC). Fueron conformados 4 subgrupos (n = 16) para cada CA de acuerdo a cada tiempo de acondicionamiento. G1: Control, G2: 5 segundos, G3: 10 segundos, G4: 20 segundos. Fueron construidos tres cilindros de CA (1 x 1 mm) sobre cada bloque. Los especímenes fueron almacenados en agua destilada a 37 °C por 24 horas. Posteriormente, la mitad de ellos fueron sometidos a una prueba de microcizallamiento en una máquina de ensayos universales, aplicando carga constante a 0,5 mm/min hasta producir la fractura. La otra mitad fue sometida a 5000 ciclos térmicos (5 °C – 55 °C) antes de la prueba. El tipo de fractura fue analizado con microscopio electrónico de barrido (MEB). Los resultados (MPa) fueron analizados con la prueba de ANOVA de tres factores y las diferencias intergrupos con T-Student o U de Mann Whitney (p < 0,05). La capa de interfase fue analizada con microscopía de escaneamiento laser confocal y MEB. Resultados: El acondicionamiento mejora significativamente la RA cuando fue comparado con los grupos de control (p < 0,05). El TC afectó negativamente la RA de los grupos sin condicionamiento (p < 0,05). Entre los grupos con condicionamiento, la RA no mostró diferencias entre sin TC y con TC (p > 0,05). Se observaron fracturas predominantemente adhesivas y mixtas en los grupos sin acondicionamiento y con acondicionamiento, respectivamente. Hubo ausencia de “tags” resinosos en los grupos sin acondicionamiento. Conclusión: El acondicionamiento sobre esmalte debe preceder al uso del XU y MC. TC no afecta la resistencia de unión en los grupos experimentales, pero sí de manera importante en los grupos control. Los periodos de tiempo de acondicionamiento no influyeron en la resistencia de unión en el XU; mientras que, en el MC en los periodos de tiempo de 5" y 10" la RA aumentó y para 20", disminuyó. El tipo de falla fue adhesiva, cohesiva y mixta después de TC.