Objetivo: Evaluar la actividad antimicrobiana del cemento experimental Portland asociado con nanoparticulas de plata en comparación al cemento Portland y el Biodentine® frente al Enterococcus faecalis ATCC 29212 y Candida albicans ATCC 90028. Materiales y métodos: Se evaluó la actividad antibacteriana y antifungica del cemento experimental Portland asociado con nanopartículas de plata, el cemento experimental Portland y el Biodentine® mediante la técnica difusión en agar en 40 placas Petri de Enterococcus faecalis y Candida albicans, asignándose 20 placas para cada grupo, para la medición de los halos de inhibición de los cementos a las 24 y 48 horas. Resultados: Se encontró que el cemento experimental Portland asociado con nanopartículas de plata presento mayor zona de inhibición que el cemento Portland y el Biodentine® a las 24 y 48 horas; el Biodentine en comparación al cemento Portland presento una mayor zona de inhibición. Conclusiones: El cemento experimental Portland asociado con nanopartículas de plata presentó un mayor halo de inhibición en la actividad antimicrobiana frente al Enterococcus faecalis ATCC 29212 y Candida albicans ATCC 90028 que el cemento Portland y el cemento Biodentine® a las 24 y 48 horas estadísticamente significativo.